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熒光分光光度計原理

日期：2025-07-15 21:35
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摘要：

很多用戶對于熒光分光光度計的原理不是很了解，為了讓大家對熒光分光光度計的原理有一個深刻的了解，上海旦鼎技術(shù)人員特意為您提供了以下資料。并為您區(qū)別熒光分光光度計與紫外分光光度計的不同之處。
      熒光分光光度計圖
一、熒光分光光度計原理
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù)，從各個角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。
物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài)，這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過程中將一部分的能量又以光的形式放出，從而產(chǎn)生熒光。
不同物質(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)的不同,其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征，這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜，因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進(jìn)行物質(zhì)的鑒定。
在溶液中，當(dāng)熒光物質(zhì)的濃度較低時，其熒光強度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系,即IF=KC，利用這種關(guān)系可以進(jìn)行熒光物質(zhì)的定量分析，與紫外-可見分光光度法類似，熒光分析通常也采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行。
熒光分光光度計原理圖 
二、熒光分光光度計與紫外分光光度計的區(qū)別
兩種儀器的原理完全不同。
1、熒光分光光度計由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中，激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光，熒光經(jīng)過濾過和反射后，被光電倍增管所接受，然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來。
2、紫外分光光度計是根據(jù)朗伯-比耳定律(Lambert－Beer)光吸收的基本定律，即物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量。
通俗的說，熒光分光光度計是測樣品中物質(zhì)被激發(fā)出了光能量，紫外分光光度計是測樣品中物質(zhì)吸收了光能量，原理完全不同。
 
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