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文章詳情
紫外分光光度計正確測DNA濃度方法
日期:2025-07-16 14:50
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摘要:
首先,分光光度計測量的樣品必須是均一的,搖勻后再測量結(jié)果會**些。它是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器。
一般用微量分光光度計比較快速簡便,DNA濃度會直接在軟件上顯示,A260 / A280的比值用于評估樣品的純度, 純凈的樣品比值大于1.8,低于2.0。較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。


核酸的定量是分光光度計使用頻率*高的功能??梢远咳苡诰彌_液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的*高吸收峰的吸收波長260 nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一,因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應(yīng)的系數(shù)。如:1OD 的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。測試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算,從而得出相應(yīng)的樣品濃度。測試前,選擇正確的程序,輸入原液和稀釋液的體積,爾后測試空白液和樣品液。然而,實(shí)驗并非一帆風(fēng)順。讀數(shù)不穩(wěn)定可能是實(shí)驗者***的問題。靈敏度越高的儀器,表現(xiàn)出的吸光值漂移越大。
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