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紫外可見分光光度計(jì)用途、原理及應(yīng)用領(lǐng)域
以下是由上海旦鼎技術(shù)人員為您詳細(xì)編寫的紫外可見分光光的用途、紫外可見分光光度計(jì)工作原理、紫外可見分光光度計(jì)的應(yīng)用(生命科學(xué)領(lǐng)域)。具體內(nèi)容請(qǐng)往下閱讀。
一、紫外可見分光光度計(jì)的用途
1.推測(cè)化合物的分子結(jié)構(gòu)。
2.紫外可見分光光度計(jì)可用于純度檢驗(yàn)。
3.紫外可見分光光度計(jì)可應(yīng)用于有機(jī)分析中。
4.反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究。
5.比較*大吸收波長(zhǎng)吸收系數(shù)的一致性。
6.用來測(cè)定絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)。
7.氫鍵強(qiáng)度的測(cè)定:實(shí)驗(yàn)證明,不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不 同溶劑中氫鍵強(qiáng)度,以確定選擇哪一種溶劑 。
8.檢定物質(zhì):根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是*大吸收波長(zhǎng)雖ax和摩爾吸收系數(shù)是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在**分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在國(guó)內(nèi)外的藥典中,已將眾多的**紫外吸收光譜的*大吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)載入其中,為**分析提供了很好的手段。
二、紫外可見分光光度計(jì)工作原理
不知大家對(duì)紅外光譜儀的工作原理是否了解,其實(shí)紫外可見分光光度計(jì)的原理與紅外光譜儀相似,都是利用一定頻率的紫外--可見光照射被分析的有機(jī)物質(zhì),引起分子中價(jià)電子的躍遷,它將有選擇的被吸收。一組吸收隨波長(zhǎng)而變化的光譜,反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內(nèi),對(duì)于一個(gè)特定的波長(zhǎng),吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度,因此測(cè)量光譜可以進(jìn)行定性分析,而且根據(jù)吸收與已知濃度的標(biāo)樣的比較,還能進(jìn)行定量分析。
三、紫外可見分光光度計(jì)的應(yīng)用(生命科學(xué)領(lǐng)域)
1.紫外可見分光光度計(jì)在核酸分析工作中的應(yīng)用
紫外可見分光光度計(jì)在核酸分析中是用來對(duì)核酸的定量進(jìn)行檢測(cè),因核酸的吸收峰在260nm。只需采用光度測(cè)量模式,將紫外可見分光光度計(jì)的波長(zhǎng)GOTO 到核酸的*大吸收峰260nm上,測(cè)試其吸光度大小即可。
2.紫外可見分光光度計(jì)在糖類分析測(cè)試工作中的應(yīng)用
在此應(yīng)用中主要是用來作定量檢測(cè)的。因糖對(duì)紫外光的主要吸收波長(zhǎng)為218nm,所以,對(duì)糖類進(jìn)行分析時(shí),只要采用光度測(cè)量模式,將紫外可見分光光度計(jì)儀器的波長(zhǎng)GOTO 到氨基酸的*大吸收峰218 nm上, 就可測(cè)試其吸光度大小, 從而計(jì)算出糖的含量。
3.紫外可見分光光度計(jì)在蛋白質(zhì)分析工作中的應(yīng)用
在這主要是用來檢測(cè)蛋白質(zhì)的含量,一般是在蛋白質(zhì)的吸收峰上作吸光度測(cè)定。因?yàn)榈鞍踪|(zhì)對(duì)紫外光的主要吸收波長(zhǎng)為280nm,所以采用光度測(cè)量模式,將儀器的波長(zhǎng)GOTO 到蛋白質(zhì)的*大吸收峰波長(zhǎng)280nm 上,測(cè)試其吸光度大小,便可完成對(duì)蛋白質(zhì)的定量檢測(cè)。操作非常簡(jiǎn)單。
4.紫外可見分光光度計(jì)在氨基酸分析工作中的應(yīng)用
用來對(duì)氨基酸的定量進(jìn)行檢測(cè),因氨基酸對(duì)紫外光的主要吸收波長(zhǎng)為230nm,所以我們只要采用光度測(cè)量模式,將紫外可見分光光度計(jì)儀器的波長(zhǎng)GOTO 到氨基酸的*大吸收峰230nm上,就可測(cè)試其吸光度大小,從而計(jì)算出氨基酸的含量。但是,因?yàn)榘被岱治鰰r(shí), 一般是將它溶解在水中,而水在230 nm 附近有很多干擾吸收線,所以,在用紫外可見分光光度計(jì)對(duì)氨基酸分析檢測(cè)時(shí),要注意防止干擾的問題。此外,還需注意:只有少數(shù)氨基酸有紫外吸收,多數(shù)氨基酸無紫外吸收或很弱,測(cè)定時(shí)要衍生化后再測(cè)。
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