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使用紫外可見分光光度計必看知識

日期：2025-07-19 21:46
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摘要：

紫外可見分光光度計是實驗室必備儀器之一，主要是用來對物質(zhì)做定性、定量分析?？蓮V泛應用于生化化學、石油化工、環(huán)境保護、醫(yī)療衛(wèi)生、臨床檢驗等領域。
一、紫外可見分光光度計外光路系統(tǒng)
1.紫外可見分光光度計的外光路系統(tǒng)一般由光源、反射鏡或透鏡組成。光源一般都是由氘燈和鎢燈( 鹵鎢燈) 及其燈架組成, 反射鏡一般用凹面反射鏡,有些儀器的外光路系統(tǒng)采用透鏡或柱面鏡。這些鏡子的作用是把光源發(fā)出的光成像在單色器的入射狹縫上, 或者說, 把光源發(fā)出的光集中到單色器的入射狹縫上, 并均勻照明單色器的入射狹縫。所以說, 光源的燈絲和入射狹縫是物像關系。
2.紫外可見分光光度計的外光路大體上有以下四種形式。①氘燈和鎢燈位于凹面反射鏡的同側(cè)。光源切換是通過電機帶動平面反射鏡移動來實現(xiàn)的。②氘燈和鎢燈位于凹面反射鏡的兩側(cè)。氘燈和鎢燈固定不動( 見圖3-12) , 光源切換是通過電機帶動凹面反射鏡震動來實現(xiàn)的。③氘燈和鎢燈固定在一個組座上。凹面反射鏡是固定的(見圖3-13)。光源切換是通過電機帶動氘燈和鎢燈固定組座移動來實現(xiàn)的。④氘鎢燈固定在凹面反射鏡的一側(cè)。若采用氘鎢燈( 氘燈和鎢燈作在一起) , 則氘鎢燈位于凹面鏡的左側(cè)或右側(cè), 凹面鏡固定不動, 光源通過凹面鏡成像在入射狹縫上。
       光度計
二、紫外可見分光光度計光度重復性測量方法
光度重復性的測試方法很簡單。一般是選定一個標準樣品（也可用使用者自己任選的樣品），，由同一個操作者，進行3-5次測試，再計算光度重復性。具體操作方法為：儀器冷態(tài)開機（即關機2h后開機），預熱半小時后，對標準樣品或使用者自選的樣品進行光譜掃描，然后，在譜圖上選擇幾個特征吸收峰，檢查在選定的測量次數(shù)內(nèi)，各個峰值的*大值與*小值之差即為光度重復性。人們經(jīng)常將光度**度和光度重復性在一次操作中完成。
三、紫外可見分光光度計線性和**度的關系
**度和線性是兩個完全不同的概念。**度是實驗值與真值之差，而線性則是實驗點偏離比耳定律直線部分的程度，兩者不能混淆。應該指出，**度一般不能直接反映儀器的線性和線性范圍，線性和線性范圍一般也不能直接反映儀器的**度。
四、紫外可見分光光度計測試數(shù)據(jù)不**的檢查方法
1.測試試樣是否光解：由于紫外可見分光光度計紫外光照射樣品，致使試樣發(fā)生光化學反應，從而引起樣品的濃度變化，會使測試結(jié)果不**。這種現(xiàn)象的發(fā)生時，應注意對樣品進行避光保護，一般是用黑紙包住樣品或采用棕色器皿裝樣品。
2.測試波長是否合適：由于測試波長不合適，可能會因為摩爾吸光系數(shù)不同，致使靈敏度不同，所以產(chǎn)生分析測試誤差。因此，要認真選擇測試波長。一般來說，要選擇*大吸收波長作為測試波長，可**得到較大的信號，從而提高性噪比，**分析測試數(shù)據(jù)的可靠性。
3.測試比色皿是否沾污：比色皿沾污是很重要的問題，有時測試熏差增大，就是比色皿沾污的結(jié)果。除數(shù)據(jù)不準外，有時，出怪峰、負峰，也是比色皿沾污所引起的。如比色皿沾污，可用20W的玻璃儀器超聲波清洗30min，一般都可以解決問題。但是*不能采用大功率超聲波來清洗比色皿，否則會損壞比色皿。目前國內(nèi)外的各類比色皿，一般都分為燒結(jié)或粘接兩種。不管是哪一種，只要用大功率超聲波清洗，肯定會毀壞比色皿。所以，使用者一定要認真對待比色皿沾污的問題。
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五、紫外可見分光光度計日常護理
1.溫度和濕度是影響可見分光光度計性能的重要因素。他們可以引起機械部件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起PH溶解氧儀部分的誤差或性能下降；造成光學部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕，產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止工作，從而影響儀器壽命。維護保養(yǎng)時應定期加以校正。應具備四季恒濕的儀器室，配置恒溫設備，特別是地處南方地區(qū)的實驗室。
2.環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體也會影響機械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成必須學部件鋁膜銹蝕的原因之一。因此必須定期清潔，保障環(huán)境和儀器室內(nèi)衛(wèi)生條件，防塵等。
       3.紫外可見分光光度計使用一定周期后，內(nèi)部會積累一定量的塵埃，*好由維修工程師或在工程師指導下定期開啟儀器外罩對內(nèi)部進行除塵工作，同時將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對光學盒的密封窗口進行清潔，必要時對光路進行校準，對機械部分進行清潔和必要的潤滑，*后，恢復原狀，再進行一些必要的檢測、調(diào)校與記錄

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