詳細(xì)介紹溫度梯度PCR和降落PCR有什么不同?
1.什么是溫度梯度PCR？溫度梯度PCR是指在退火溫度不太明確時(shí)，為了找到**退火溫度，在一臺PCR儀上同時(shí)做多管PCR反應(yīng)。每一管放在儀器內(nèi)不同列或是不同行上，分別進(jìn)行PCR反應(yīng)。例如：在50℃-60℃可以分6管，分別為50，52，54，56，58，60度。在不同的管類進(jìn)行PCR反應(yīng)。PCR反應(yīng)后，經(jīng)過電泳檢測的比較，看看哪個(gè)溫度的****。總之是通過溫度梯度PCR反應(yīng)，來進(jìn)行退火溫度的*化。

2.什么是降落PCR？降落PCR是在同一個(gè)PCR管內(nèi)進(jìn)行PCR反應(yīng)，只是每個(gè)循環(huán)的溫度不同（如每個(gè)循環(huán)降1度）。一般兼并引物多采用這種方法。降落PCR（touchdown PCR），通過設(shè)計(jì)多循環(huán)反應(yīng)的程序，以使相連循環(huán)的退火溫度越來越低。由于開始時(shí)的退火溫度選擇為高于估計(jì)的Tm值，隨著循環(huán)的進(jìn)行，退火溫度逐漸降到Tm值，并*終低于這個(gè)水平，用于確保**個(gè)引物—模板雜交事件發(fā)生在*互補(bǔ)的反應(yīng)物之間，即那些產(chǎn)生目的擴(kuò)增產(chǎn)物的反應(yīng)物之間。盡管退火溫度*終會降到非特異雜交的Tm值，但此時(shí)目的擴(kuò)增產(chǎn)物已開始幾何擴(kuò)增，在剩下的循環(huán)中處于超過任何滯后（非特異）PCR產(chǎn)物的地位。由于目標(biāo)是在較早的循環(huán)中避免低Tm值配對，在TD—PCR中*好應(yīng)用熱啟動技術(shù)。設(shè)計(jì)時(shí)，退火溫度的范圍應(yīng)跨越15℃左右，從高于估計(jì)Tm值至少幾度到低于它10℃。實(shí)驗(yàn)中如持續(xù)出現(xiàn)假象帶（雜帶），則是因?yàn)槠鹗纪嘶饻囟忍停蚰康臄U(kuò)增產(chǎn)物和非目的產(chǎn)物的Tm值相差無幾，或非目的擴(kuò)增物以更高的擴(kuò)增效率擴(kuò)增，可把退火溫度每降低1℃所需的循環(huán)數(shù)增加到3或4。

更多關(guān)于PCR儀的產(chǎn)品請點(diǎn)擊：

http://www.fuliwtk.cn/shopdetail/secondctg/20101119-2566733/1.html

上海旦鼎國際貿(mào)易有限公司（www.fuliwtk.cn）位于中國上海浦東新區(qū)，**從事MRO工業(yè)品的生產(chǎn)、**和直銷。上海旦鼎（www.shddgj.com）擁有國內(nèi)外眾多知名工業(yè)領(lǐng)域產(chǎn)品的中國區(qū)**權(quán)限和一支*良國際采購團(tuán)隊(duì)，為國內(nèi)企業(yè)客戶提供高性能的國產(chǎn)及進(jìn)口工業(yè)和實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備。上海旦鼎國際貿(mào)易有限公司實(shí)力雄厚，重信用、守合同、**產(chǎn)品質(zhì)量，以多品種經(jīng)營特色和薄利多銷的原則，贏得了廣大客戶的信任。