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細胞培養(yǎng)的注意事項

日期：2025-07-19 22:45
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摘要：

體外培養(yǎng)的細胞直接生活在培養(yǎng)基中，因此培養(yǎng)基應能滿足細胞對營養(yǎng)成分、促生長因子、**、滲透壓、pH等諸多方面的要求。細胞培養(yǎng)的注意事項：
一、營養(yǎng)成分 維持細胞生長的營養(yǎng)條件一般包括以下幾個方面：  1.氨基酸：是細胞合成蛋白質(zhì)的原料。**細胞都需要12種必須氨基酸，此外還需要谷氨酰胺，它在細胞代謝過程中有重要作用，所含的氮是核酸中嘌令和嘧啶合成的來源。  2.單糖：培養(yǎng)中的細胞可以進行有氧與無氧酵解，細胞對葡萄糖的吸收能力*高，半乳糖*低。體外培養(yǎng)動物細胞時，幾乎**的培養(yǎng)基或培養(yǎng)液中都以葡萄糖作為必含的能源物質(zhì)。  3.維生素：主要扮演輔酶、輔基的角色，必不可少。  4.無機離子與微量元素：細胞生長除需要鈉、鉀、鈣、鎂、氮和磷等基本元素，還需要微量元素，如鐵、鋅、硒等。 
二、促生長因子及** 各種**、生長因子對于維持細胞的功能、保持細胞的狀態(tài)（分化或未分化）具有十分重要的作用。有些**對許多細胞生長有促生長作用，如胰島素，它能促進細胞利用葡萄糖和氨基酸。有些**對某一類細胞有明顯促進作用，如氫化可的松可促進表皮細胞的生長等。 
三、滲透壓 細胞必須生活在等滲環(huán)境中，大多數(shù)培養(yǎng)細胞對滲透壓有一定耐受性。人血漿滲透壓290mOsm/kg, 可視為培養(yǎng)人體細胞的理想滲透壓。對于大多數(shù)哺乳動物細胞，滲透壓在260－320mOsm/kg的范圍都適宜。 
四、pH值動物細胞大多數(shù)需要輕微的堿性條件，pH值約在7.2-7.4在細胞生長過程中，隨細胞數(shù)量的增多和代謝活動的加強，二氧化碳不斷被釋放，培養(yǎng)液變酸，PH值發(fā)生變化。由于NaHCO3容易分解為二氧化碳，很不穩(wěn)定，致使緩沖系統(tǒng)難以**地控制。合成培養(yǎng)基中使用了NaHCO3-CO2緩沖系統(tǒng)，并采用開放培養(yǎng)，使細胞代謝產(chǎn)生的CO2及時溢出培養(yǎng)瓶，再通過穩(wěn)定調(diào)節(jié)溫箱中CO2濃度（5％），與培養(yǎng)基中的NaHCO3處于平衡狀態(tài)。 
五、無毒、無污染的微環(huán)境 體外生長的細胞對微生物及一些有害有毒物質(zhì)沒有抵抗能力，因此培養(yǎng)基應達到無化學物質(zhì)污染、無微生物污染（如**、**、支原體、病毒等）、無其他對細胞產(chǎn)生損傷作用的生物活性物質(zhì)污染（如抗體、補體）。
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