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暗視野顯微鏡的原理和使用方法

日期:2025-07-23 03:35
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摘要:

暗視野顯微鏡(dark field microscope)的聚光鏡中央有擋光片,使照明光線不直接進(jìn)人物鏡,只允許被標(biāo)本反射和衍射的光線進(jìn)入物鏡,因而視野的背景是黑的,物體的邊緣是亮的。利用這種顯微鏡能見到小至 4~200nm的微粒子,分辨率可比普通顯微鏡高50倍。暗視野顯微鏡的原理和使用方法:

1、原理:暗視野顯微鏡是利用丁達(dá)爾(Tyndall)光學(xué)效應(yīng)的原理,在普通光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上改造而成的。暗視野聚光器,使光源的中央光束被阻擋。不能由下而上地通過標(biāo)本進(jìn)入物鏡。從而使光改變途徑,傾斜地照射在觀察的標(biāo)本上,標(biāo)本遇光發(fā)生反射或散射,散射的光線投入物鏡內(nèi),因而整個(gè)視野是黑暗的。

2、適用范圍:暗視野顯微鏡常用來觀察未染色的透明樣品。這些樣品因?yàn)榫哂泻椭車h(huán)境相似的折射率,不易在一般明視野之下看的清楚,于是利用暗視野提高樣品本身與背景之間的對(duì)比。這種顯微鏡能見到小至4~200nm的微粒子,只能看到物體的存在、運(yùn)動(dòng)和表面特征,不能辨清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)。

3、使用方法(1) 把暗視野聚光器裝在顯微鏡的聚光器支架上。(2) 選用強(qiáng)的光源,但又要防止直射光線進(jìn)入物鏡,所以一般用顯微鏡燈照明。(3)在聚光器和標(biāo)本片之間要加一滴香柏油,目的是不使照明光線于聚光鏡上面進(jìn)行全反射,達(dá)不到被檢物體,而得不到暗視野照明。(4)升降集光器,將集光鏡的焦點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)被檢物體,即以圓錐光束的*點(diǎn)照射被檢物。如果聚光器能水平移動(dòng)并附有中心調(diào)節(jié)裝置,則應(yīng)首**行中心調(diào)節(jié),使聚光器的光軸與顯微鏡的光軸嚴(yán)格位于一直線上。(5) 選用與聚光器相應(yīng)的物鏡,調(diào)節(jié)焦距,找到所需觀 察的物像。

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