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文章詳情
如何選購熒光定量PCR儀
日期:2025-07-23 10:58
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摘要:
1、儀器的檢測通量在購買定量PCR儀的時候要根據(jù)實(shí)驗(yàn)實(shí)的需要來選擇不同通量的儀器。目前市面上的熒光定量PCR的檢測通量小到16個多到384個。如何選購熒光定量PCR儀?如果進(jìn)行一般的基因表達(dá)研究或病原體檢測,實(shí)在不必購買昂貴的儀器,96孔的通量足夠用;需要尋找要新藥靶點(diǎn)和**標(biāo)記的實(shí)驗(yàn)室可以考慮購買384孔板的儀器。假如經(jīng)費(fèi)有限無法購買384孔板儀器的實(shí)驗(yàn)室,可以考慮購買運(yùn)行速度快(帶有FAST模塊)的96孔板熒光定量PCR儀。
2、硬件設(shè)計(jì)特點(diǎn)熒光定量PCR儀主要有傳統(tǒng)的96孔板式、**的離心式等,每種設(shè)計(jì)都有它的*到之處但也都有無法避免的缺憾。傳統(tǒng)的96孔板的熒光定量PCR可以容納的樣本量大,而且無需特殊的耗材。有些傳統(tǒng)的96孔板的儀器采用鹵鎢燈激發(fā)、CCD檢測,這些光學(xué)結(jié)構(gòu)在96孔板的*部,每個樣品孔距光源和檢測器的光程各不相同——邊緣效應(yīng),對結(jié)果產(chǎn)生影響。為了****、**的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,這類儀器在實(shí)驗(yàn)過程中通常會使用ROX(一種熒光染料)或?qū)S玫腞eferencedye作為參照校正實(shí)驗(yàn)結(jié)果。鹵鎢燈的使用壽命短、更換成本較高已經(jīng)成為很多用戶**的問題。在實(shí)驗(yàn)過程中鹵鎢燈作為一種熱光源,產(chǎn)生較多熱能對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有一定的影響。CCD*大的*點(diǎn)就是可以同時掃描**樣品中的熒光信號,但是靈敏度較低,而且同時檢測樣品間的熒光信號存在干擾。**的離心式的儀器通常選用LED激發(fā)、PMT檢測,離心式的設(shè)計(jì)上避免了邊緣效應(yīng)。LED光源是冷光源對實(shí)驗(yàn)沒有影響,因此無需采用其他熒光染料校正儀器,而且使用壽命長無需經(jīng)常更換。PMT每次只能收集單個熒光信號,但是檢測靈敏度高。但這類儀器運(yùn)行速度非???,但也存在樣本量小、耗材昂貴、沒有梯度功能、存在時間積分等缺點(diǎn)。
3、運(yùn)行速度在熒光定量PCR儀的眾多技術(shù)參數(shù)中,升降溫速度也是喜歡大力宣傳的指標(biāo)。更快的升降溫,可以縮短反應(yīng)進(jìn)行的時間,而且縮短了可能的非特異性結(jié)合、反應(yīng)的時間,提高PCR的特異性。為了更好的完成實(shí)驗(yàn),各個廠家紛紛推出能快速運(yùn)行的熒光定量PCR儀。
4、靈活性大規(guī)模繁忙的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備固然讓人羨慕,但是常規(guī)實(shí)驗(yàn)室同樣可以有精彩的選擇?,F(xiàn)在的儀器供應(yīng)商擁有眾多技術(shù)專家,有的還能提供整個分子生物學(xué)的基礎(chǔ)研究平臺,不但了解、滿足您現(xiàn)在的需求,而且還考慮到了你可能變化的需求——升級和更換模塊。