光學(xué)顯微攝影的常見方法，顯微鏡是一種觀察微觀事物的重要光學(xué)儀器。利用它的高倍放大作用可以觀察到肉眼直接看不到的信息。顯微攝影又可以把顯微鏡觀察到的現(xiàn)象記錄下來(lái)，供人們更廣泛的研究。顯微鏡分為光學(xué)顯微鏡和非光學(xué)顯微鏡兩類。（非光學(xué)顯微鏡有電子顯微鏡、超聲波顯微鏡等）普通光學(xué)顯微攝影裝置就是將普通相機(jī)與顯微鏡組合在一起，利用相機(jī)記錄本來(lái)由人眼觀察的顯微圖像。

（1）光學(xué)顯微攝影的用光方法拍攝顯微照片，要求有明亮、均勻、無(wú)反光的照明條件，其照明方法可分為兩類，即透射照明和反射照明（落射光照明）透射光照明是指從光源射出的光線從標(biāo)本的下面透過(guò)標(biāo)本進(jìn)入物鏡。而落射照明是指光線從正面投射到標(biāo)本的正面，物鏡接受的光是從標(biāo)本反射來(lái)的光。透射光照明通常按照克列爾（Kohler）照明法調(diào)節(jié)光路便可以獲得上等效果。使用時(shí)調(diào)節(jié)光源光闌和距離使照明光束投射到反光鏡中央。關(guān)閉聚光鏡光闌，移動(dòng)光源透鏡，使燈絲清晰地在聚光鏡的孔徑光闌平面成像。先將樣品聚焦，隨后從載物臺(tái)上除去標(biāo)本，通過(guò)目鏡對(duì)焦，上下移動(dòng)對(duì)焦器，直到標(biāo)本平面上出現(xiàn)光源光闌的像。聚光器光闌通常收縮至0.6～0.7厘米（直徑），與光源光闌配合，除去光斑得到鮮明的像。在高倍顯微攝影時(shí)，要一面收縮聚光器光闌，一面觀察，使出現(xiàn)的燈絲像達(dá)到*大，大約使光源距離距顯微鏡達(dá)40-50cm為好。落射光照明主要用于拍攝不透明的標(biāo)本，如皮膚、小生物、植物果實(shí)表面等。拍出的像有立體感。落射光與物鏡之間的角度越小越好，現(xiàn)代顯微攝影裝置的落射光大多與物鏡合軸。在沒(méi)有**設(shè)備的情況下可以用斜射照明，在對(duì)應(yīng)面加反光屏，或用另一只燈做輔助光，也可以使用環(huán)形閃光燈。

（2）光學(xué)顯微攝影中濾色鏡的應(yīng)用濾色片幾乎在拍攝什么樣的標(biāo)本都有用場(chǎng)。例如：用濾色片校正反差突出重點(diǎn)光學(xué)顯微攝影往往要突出重點(diǎn)，這就要使用適當(dāng)?shù)臑V色鏡加強(qiáng)反差，強(qiáng)調(diào)需要突出的重點(diǎn)結(jié)構(gòu)，而減弱其非重點(diǎn)部分。使用標(biāo)本染色補(bǔ)色的濾色鏡可以增強(qiáng)標(biāo)本反差，比如蘇木精染出的色標(biāo)本中用綠濾色鏡，就可增強(qiáng)反差。兩種顏色的結(jié)構(gòu)體現(xiàn)：如果想使標(biāo)本中兩種以上的顏色都清楚地呈現(xiàn)在畫面上，如紅、藍(lán)兩種顏色，可以采取兩次曝光的方法，先用紅濾色鏡，再用藍(lán)濾色鏡各曝一次光，就可以清楚地體現(xiàn)兩種顏色的結(jié)構(gòu)。 

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