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分子雜交儀原理和應(yīng)用
分子雜交(簡(jiǎn)稱雜交,hybridization)是核酸研究中一項(xiàng)*基本的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。其基本原理就是應(yīng)用核酸分子的變性和復(fù)性的性質(zhì),使來(lái)源不同的 DNA(或RNA)片段,按堿基互補(bǔ)關(guān)系形成雜交雙鏈分子(heteroduplex)。雜交雙鏈可以在DNA與DNA鏈之間,也可在RNA與DNA鏈之間形成。分子雜交儀原理和應(yīng)用。
核酸分子雜交是基因診斷的*基本的方法之一。它的基本原理是:互補(bǔ)的DNA單鏈能夠在一定條件下結(jié)合成雙鏈,即能夠進(jìn)行雜交。這種結(jié)合是特異的,即嚴(yán)格按照堿基互補(bǔ)的原則進(jìn)行,它不僅能在DNA和DNA之間進(jìn)行,也能在DNA和RNA之間進(jìn)行。因此,當(dāng)用一段已知基因的核酸序列作出探針,與變性后的單鏈基因組DNA接觸時(shí),如果兩者的堿基完全配對(duì),它們即互補(bǔ)地結(jié)合成雙鏈,從而表明被測(cè)基因組DNA中含有已知的基因序列。由此可見(jiàn),進(jìn)行基因檢測(cè)有兩個(gè)必要條件,一是必需的特異的DNA探針;二是必需的基因組DNA。當(dāng)兩者都變性呈單鏈狀態(tài)時(shí),就能進(jìn)行分子雜交。
廣泛地使用于克隆基因的篩選、酶切圖譜的制作、基因組中特定基因序列的定性、定量檢測(cè)和**的診斷等方面。因而它不僅在分子生物學(xué)領(lǐng)域中具有廣泛地應(yīng)用,而且在臨床診斷上的應(yīng)用也日趨增多。
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